Les graines
d'orchidées
D'abord un petit rappel sur la multiplication sexuée des orchidées.
Ces plantes ont la réputation d'être particulièrement complexes à cultiver, et
ce n'est pas pour rien, car même l'obtention de graine et leur semis sont
délicats.
La fécondation des fleurs se réalise à la main car, pour faire simple, les
fleurs ne sont butinées dans la nature que par une catégorie particulière
d'insecte (pardonnez le simplisme des explications et la généralisation
outrancière, sachant qu'il existe des dizaines de milliers d'espèces
d'orchidées !!!).
Une fois les fleurs fécondées, la maturation des fruits prend plusieurs
mois.
Les fruits contiennent des millions de minuscules graines qui, contrairement
aux graines de haricot, par exemple, ne contiennent pas les réserves nutritives
indispensables à la germination et à la croissance du plant non encore autonome
(pas de racine).
Ces substances nutritives sont apportées par un
champignon vivant en
symbiose avec ces jeunes plants d'orchidées.
In vitro, ce champignon peut être remplacé par un
milieu nutritif
synthétique : d'où la
culture in vitro.
Choix pour la
première culture
Pour se lancer dans les semis d'orchidées, 2 possibilités : collecter le
maximum d'informations auprès de sources variées, et acquérir le matériel chez
différents fournisseurs, ou bien acheter un kit de culture.
J'ai opté pour la seconde solution pour réduire les risques d'échec !
C'est chez
Vacherot que j'ai
fait l'
acquisition de
ce kit (Mérys). C'est très cher quand on voit ce qu'il contient : un peu
de verrerie, une spatule, un scalpel etc. (on trouve tout ça pour trois fois
rien chez les fournisseurs de matériel de laboratoire), très peu de milieu de
culture, pas beaucoup plus de produit désinfectant, du substrat, des pots et
des graines.
Bref, je suis satisfait de l'achat pour :
- Le
milieu prêt à
l'emploi
- Les
graines
- La
notice
suffisamment claire
Les grandes
lignes techniques
La
préparation des
milieux ne demande pas de grosses difficultés :
- Dissolution et coulage le milieu
- Stérilisation des flacons en cocotte minute
La
stérilisation des
graines avec l'hypochlorite de sodium est plus délicate :
- Dissolution des sels et filtration
- Mise en présence de la solution de désinfection et des graines
- Séparation des graines et de la solution : c'est le point délicat (voir
ci-dessous)
L'
ensemencement des
milieux :
- Stérilisation du matériel de prélèvement
- Manipulation en conditions stériles sous la
hotte "à flux laminaire" maison !!!!
La
stérilisation des graines
La technique proposée par Mérys consiste à retourner le tube contenant les
graines en suspension pour les laisser flotter et former un anneaux.
L'ouverture du bouchon tube retourné est sensée laisser échapper la solution
mais pas les graines qui devraient restées collées aux parois.
Les problèmes sont
multiples à cette étape :
- En fonction des espèces d'orchidées, les graines viables stérilisées flottent
ou sédimentent !
- Les graines non viables font l'inverse
- Si la quantité de graines est insuffisante, et le diamètre du tube trop
important, les graines ne se collent pas aux parois
- Pour les graines viables qui flottent, certains préconisent de laisser
s'écouler le liquide doucement et d'autre rapidement
Dans mon cas, je n'ai pas pu récupérer beaucoup de graines. Grosse déception
!
La solution : la
centrifugation pour séparer la totalité des graines.
Le
bilan
Cette première expérience a été très riche et a permis d'utiliser la
hotte
stérile.
L'incubateur
n'est pas encore prêt pour accueillir les premiers semis, donc l'incubation se
fera à température ambiante à la lumière du jour.
Le prochain matériel à fabriquer
pour le bio fablab : une
centrifugeuse !!
Lorsque ce matériel sera prêt, de nouveaux semis seront réalisés avec des
graines, des milieux et de la verrerie provenant de différents
fournisseurs.

Kit
in vitro Mérys (1)
Kit in vitro Mérys (2)
Matériel de culture
Manipulations sous hotte